色谱

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去锌牛胰岛素的制备和鉴定

陈建锋1,张薇1,樊柳荫1,任吉存2,曹成喜1

  

  • 收稿日期:2007-04-03 修回日期:2007-05-24 出版日期:2007-11-30 发布日期:1984-12-25
  • 通讯作者: 曹成喜

  • Received:2007-04-03 Revised:2007-05-24 Online:2007-11-30 Published:1984-12-25

摘要:

锌离子在胰岛素中扮演着非常重要的角色,这是因为通过金属离子与蛋白质之间的相互作用,使得胰岛素的结构发生变化并影响胰岛素的生物功能。因此,去锌胰岛素在金属和蛋白识别以及结构研究中是必需的。该文采用乙二胺四乙酸(EDTA)二钠盐与锌离子进行配合作用形成稳定的[Zn-EDTA]2-配合物来去除胰岛素中的锌离子,然后用Sephadex G-25柱对体系进行凝胶过滤,以除去胰岛素中的配合物和原有的苯酚,并用电喷雾离子化质谱对分离的物质进行鉴定。结果显示除去锌离子的胰岛素与EDTA配合物的分离效果良好。采用原子吸收光谱来检验胰岛素馏分中锌离子的去除效果,结果显示94.3%的锌离子被去除,表明EDTA配合锌离子的效果显著。所有结果均表明该方法可用来制备去锌牛胰岛素。

关键词: 电喷雾离子化质谱(ESI-MS), 鉴定(identification) , 凝胶色谱(gel chromatography), 去锌胰岛素(zinc-free insulin), 乙二胺四乙酸(EDTA), 原子吸收光谱(AAS), 制备(preparation)