高效液相色谱-串联质谱法测定电子烟油中咖啡因和牛磺酸

doi:10.3724/SP.J.1123.2025.09003

摘要/Abstract

摘要：

为保护消费者健康，电子烟油中禁止添加咖啡因和牛磺酸。然而，由于这两个化合物极性差异大，针对它们的同时检测仍面临挑战。本研究通过筛选和优化不同功能团的色谱柱及其分离条件，使用同时具有多种分离模式的色谱柱，建立了高效液相色谱-串联质谱同时检测电子烟油中咖啡因和牛磺酸的分析方法。样品经50%乙腈水溶液提取，以乙腈和0.1%甲酸水溶液（含10 mmol/L甲酸铵）作为流动相梯度洗脱，使用FMD Comixsil ACRP色谱柱（100 mm×2.1 mm，3.0 µm）分离，在多反应监测模式下，通过串联质谱检测器进行检测，外标法定量。结果表明，咖啡因和牛磺酸在色谱柱上都得到了很好的保留，且峰形好，无拖尾。咖啡因在1.00~100 μg/L范围内线性关系良好（r=0.997），牛磺酸在10.0~1 000 μg/L范围内线性关系良好（r=0.998）。咖啡因、牛磺酸的检出限分别为0.100、1.00 mg/kg，定量限分别为0.250、2.50 mg/kg。在1倍、2倍、10倍3个添加水平下，各组分回收率为88.2%~99.0%，相对标准偏差（RSD）为2.2%~6.6%（n=6）。本方法简单、快速，灵敏度高，可为电子烟的质量监管提供技术支撑。

关键词: 高效液相色谱-串联质谱, 电子烟油, 咖啡因, 牛磺酸

Abstract:

Electronic cigarette refers to electronic delivery systems designed to generate aerosols for human inhalation. In recent years， the global electronic cigarette market has experienced rapid expansion， drawing widespread international attention to its potential health impacts. To protect consumer health， China’s mandatory National Standard for electronic cigarettes issued in 2022 explicitly prohibits the addition of additives and stimulants associated with energy and vitality in electronic cigarette oil. However， to attract consumers， many illicit manufacturers illegally incorporate various stimulating substances into e-liquids. While detection methods have been reported for some illegal additives such as industrial cannabinoids and sweeteners in electronic cigarette oil， there is no fast and reliable detection method for the determination of caffeine and taurine in electronic cigarette oil available to this day. In order to ensure human health， a method was developed for the simultaneous determination of caffeine and taurine in electronic cigarette oil using high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （HPLC-MS/MS） with a mixed-functional column. Sample preparation involved a simple dilution and filtration step， which was optimized prior to analysis. The analytes were separated on a FMD Comixsil ACRP column （100 mm×2.1 mm， 3.0 μm）. The column temperature was maintained at 30 ℃. The mobile phase consisted of acetonitrile and a 0.1% formic acid solution containing 10 mmol/L ammonium formate with gradient elution. The flow rate was 0.2 mL/min and the injection volume was 1μL. Mass spectrometric detection was carried out using electrospray ionization in positive mode （ESI⁺） with multiple reaction monitoring （MRM）. Under the optimized conditions， both caffeine and taurine were well retained on the chromatographic column， exhibiting excellent， tailing-free peak shapes. The method demonstrated that the limits of detection of caffeine and taurine were 0.100 and 1.00 mg/kg， and the limits of quantification were 0.250 and 2.50 mg/kg， respectively. The linear correlation coefficient （r） was ≥0.997. The average recovery of each component was 88.2%-99.0%， with relative standard deviation （RSD， n=6） between 2.2% and 6.6%. These results indicate that the method is simple， rapid and accurate. It has been successfully applied to the detection of caffeine and taurine in real electronic cigarette oil samples.

Key words: high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （HPLC-MS/MS）, electronic cigarette oil, caffeine, taurine

中图分类号:

O658

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图/表 6

图1 牛磺酸和咖啡因的结构式

Fig. 1 Structural formulas of taurine and caffeine

表1 咖啡因和牛磺酸的最优质谱参数

Table 1 Optimized mass spectrometric parameters of caffeine and taurine

Compound	Q1 mass	Q3 mass	DP/V	CE/eV
Caffeine	195.2	110.2	10.0	31.0
Caffeine	195.2	138.1^*	10.0	28.0
Taurine	126.1	44.4	10.0	27.0
Taurine	126.1	108.0^*	10.0	16.0

图2 咖啡因和牛磺酸使用3种色谱柱进行分离时的总离子流色谱图

Fig. 2 Total ion chromatograms for the separation of caffeine and taurine on three different columns

图3 电子烟油空白样品同时加入咖啡因和牛磺酸后的提取离子色谱图

Fig. 3 Extracted ion chromatograms of a blank electronic cigarette oil sample spiked with caffeine and taurine

表2 咖啡因和牛磺酸的线性范围、相关系数、检出限和定量限

Table 2 Linear ranges， correlation coefficients （r）， limits of detection （LODs） and limits of quantification （LOQs） of caffeine and taurine

Compound	Linear range/（μg/L）	r	LOD/（mg/kg）	LOQ/（mg/kg）
Caffeine	1.00-100	0.997	0.100	0.250
Taurine	10.0-1000	0.998	1.00	2.50

表3 各组分在3水平下的回收率和相对标准偏差（n=6）

Table 3 Recoveries and relative standard deviations of each component at three levels （n=6）

Compound	Spiked level/（mg/kg）	Recovery/%	RSD/%
Caffeine	0.250	88.2	6.6
	0.500	91.8	6.5
	2.50	97.2	5.3
Taurine	2.50	95.6	3.6
	5.00	95.7	2.2
	25.0	99.0	3.4

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