色谱

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第44卷第3期目次

2026, 44 (3): 0-0.

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临床分析专辑引言

王思明, 康经武

2026, 44 (3): 225-225. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2026.01008

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色谱-质谱技术在多发性硬化临床分析中的应用

要振榆, 王玉飞, 朱晓雯, 杨红, 武佳, 张国军

2026, 44 (3): 226-233. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.03024

摘要 ( 173 )

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多发性硬化（multiple sclerosis，MuS）是一种中枢神经系统慢性炎症和脱髓鞘疾病，全球患病率持续上升。其发病机制复杂，涉及免疫异常、遗传及环境因素，临床表现多样，在诊断与治疗方面面临挑战。代谢组学通过分析小分子代谢物，为揭示MuS病理机制和识别生物标志物开辟了新途径，尤其是在氨基酸和脂质代谢异常与炎症、髓鞘损伤及免疫反应关联的研究中发挥着重要作用。本文综述了色谱-质谱技术在MuS代谢标志物研究中的应用进展，聚焦氨基酸和脂质代谢的关键作用。回顾了液相色谱-串联质谱、高分辨质谱、气相色谱-质谱及基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱等技术，分析了MuS患者体液和组织样本中的代谢变化。通过总结代表性研究，探讨了这些技术在代谢物检测方面的应用。结果显示，MuS患者脑脊液中精氨酸代谢和色氨酸代谢途径紊乱，与氧化应激相关的焦谷氨酸水平发生变化；脂质代谢方面，脂肪酸、胆固醇和鞘脂代谢异常与免疫失调、髓鞘损伤及神经炎症关联。色谱-质谱技术以高灵敏度、高分辨率和高通量优势，为揭示MuS代谢异常发挥关键作用，为早期诊断、病情监测及个性化治疗提供了潜在标志物。

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人血清中30种磷脂酰胆碱与溶血磷脂酰胆碱同系物的液相色谱-串联质谱测定及其与冠心病的关联分析

李汶煜, 刘朝阳, 董军, 杨睿悦, 李红霞, 陈文祥, 王思明

2026, 44 (3): 234-247. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.08011

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磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱同系物与冠状动脉粥样硬化密切相关，准确测定其含量可以为临床上冠心病的诊断和预后提供重要依据。本研究建立了一种基于液相色谱-串联质谱的分析方法，仅需10 μL人血清即可同时实现30种磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱同系物的准确测定。采用甲醇-乙腈-甲基叔丁基醚-水作为萃取体系，选用XBridge C18色谱柱，以乙腈-水（1∶1，体积比）混合溶液和异丙醇溶液作为流动相，两相均含有7.5 mmol/L甲酸铵与0.15%（体积分数）甲酸，进行梯度洗脱分离，采用电喷雾离子源，正离子多反应离子检测模式。经验证，该方法线性关系良好，平均线性相关系数≥0.999 7，线性范围为0.125~100 μg/mL，检出限和定量限分别为0.01~1.94 μg/mL和0.03~6.48 μg/mL，回收率为85.4%~114.3%，日内精密度和日间精密度分别不大于4.6%和12.6%。使用本方法测定了临床上110名接受冠状动脉造影术志愿者的血清样本，磷脂酰胆碱同系物平均人群质量浓度为526.80 μg/mL，溶血磷脂酰胆碱同系物平均人群质量浓度为73.67 μg/mL。Spearman相关性检验分析发现，磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱同系物与冠心病严重程度以及相关临床生化、血脂代谢指标存在密切关联，提示其可作为临床冠心病的潜在相关代谢物。本研究针对临床分析需求设计，具有血清用量少、操作简便、响应优良等特点，可高效实现人血清中30种磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱同系物的测定，为探究二者与冠心病的关联及生物标志物转化应用提供了重要参考。

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糖化血红蛋白参考方法的建立及国际比对

王默, 张顺利, 张瑞, 宋旖川, 石洁, 薛桥臻, 胡炎伟

2026, 44 (3): 248-256. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.03017

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为促进北京地区范围内医学实验室糖化血红蛋白检测结果的标准化和一致化，北京市临床检验中心建立了糖化血红蛋白的参考方法，并参加了欧洲糖化血红蛋白参考实验室网络组织的参考实验室糖化血红蛋白A1c（HbA1c）国际比对计划以验证该方法的准确性。样本采用谷氨酸内切蛋白酶进行消化，采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS），以含0.1%甲酸的甲醇水溶液为流动相，梯度洗脱，在电喷雾离子源多反应监测模式下，对HbA1c国际样本进行检测。糖化与非糖化六肽均在3 min内出峰，标准曲线的线性相关系数为0.999 6～0.999 8，批内变异系数为0.35%～2.20%，总变异系数为0.83%～2.39%。国际临床化学和实验室医学联合会（IFCC）组织方将单个实验室结果与总体中位数之间的差异与总体中位数进行对比，并根据线性关系计算比例偏移（斜率）和系统偏移（截距），用斜率和截距共同计算得出实验室的综合统计的检验值，2018-2024年，本实验室检测结果的比例偏移范围为-0.009～0.021，系统偏移范围为-0.69～1.27，综合统计检验结果最大值为3.0，最小值为0.1。结果表明所建立的HbA1c参考方法性能良好，2018-2024年IFCC国际比对成绩满意。

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孕期类固醇激素的液相色谱-串联质谱检测方法建立及与化学发光法一致性分析

吴伟祥, 吴立红, 刁福强, 罗有文, 古春明, 骆明勇

2026, 44 (3): 257-266. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.07001

摘要 ( 186 )

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类固醇激素在妊娠和胎儿发育中发挥重要作用，其准确检测对评估孕期内分泌状态具有重要临床价值。当前我国临床常用的化学发光免疫分析法（CLIA）在方法学上存在一定局限性，而液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）虽已被国际公认为更可靠的检测手段，但在我国尚未得到广泛应用，且针对孕妇群体中两种检测方法的一致性评价仍缺乏系统性研究。本研究建立并验证了一种基于LC-MS/MS的多激素检测方法，可同时测定血清中皮质醇、硫酸脱氢表雄酮（DHEAS）、睾酮和17α-羟孕酮（17-OHP）。该方法线性决定系数>0.999，定量限（LOQ）为0.008~0.137 ng/mL，加标回收率为92.1%~110.9%，相对标准偏差（RSD）为3.2%~9.0%，可满足临床检测要求。在94例孕妇样本中的一致性分析结果显示，两种方法测得结果在所有激素水平上均存在显著差异（P均<0.001），其中LC-MS/MS测得的皮质醇和DHEAS水平显著低于CLIA，而睾酮和17-OHP水平则显著高于CLIA。Bland-Altman分析显示，皮质醇（-56.29 ng/mL）和DHEAS（-1 079.68 ng/mL）存在负向偏倚，睾酮（0.22 ng/mL）和17-OHP（0.89 ng/mL）存在正向偏倚，且偏倚随浓度升高而扩大。两种方法在4种激素检测中均具有高度正相关（P<0.001，r=0.819~0.974）。Passing-Bablok回归分析结果发现，皮质醇的一致性回归方程为C_LC-MS/MS=-3.58+0.57C_CLIA，存在明显的比例性偏倚；DHEAS的方程为C_LC-MS/MS=-59.77+0.38C_CLIA，存在固定性偏倚和比例性偏倚；睾酮的方程为C_LC-MS/MS=-0.05+1.30C_CLIA，存在固定性和比例性偏倚，且随着浓度升高差异逐渐加大；17-OHP的方程为C_LC-MS/MS=0.10+1.75C_CLIA，存在比例性偏倚，且差异随浓度增加而扩大。本研究不仅建立了高灵敏度、高准确性的多激素LC-MS/MS检测方法，也揭示了其与CLIA之间的系统性差异。研究结果提示临床医生在解读检测结果时，需充分考虑检测方法的差异性，降低因检测误差导致的临床误诊风险。未来应在更大样本中验证其临床适用性，并推动LC-MS/MS在孕期内分泌监测中的标准化应用。

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3种液相色谱-串联质谱法检测脂溶性维生素的性能确认和一致性评价

李炳杵, 李冰慧, 陈芷阳, 李子阳, 尹美玲, 吕星, 项忠元, 龙琪琛, 胡敏

2026, 44 (3): 267-275. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.04002

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精准测定脂溶性维生素A、D、E、K（VA、25（OH）D、VE、VK）水平对健康评估与疾病诊断具有重要价值，液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）因其高特异性与灵敏度成为其主要检测手段，但方法间结果的可比性与一致性仍待提升。本研究依据CLSI C62及《液相色谱-质谱临床应用建议》，对3种LC-MS/MS方法检测脂溶性维生素的线性范围、检出限、定量限、精密度和准确度等进行系统评估。研究选取中南大学湘雅二医院于2022年8月至10月期间留存的40例剩余血清样本，采用3种LC-MS/MS方法进行脂溶性维生素检测。通过Passing-Bablok回归分析评估3种方法之间的相关性，绘制Bland-Altman图分析其相对偏差，并以一致性相关系数（CCC）评价3种方法检测结果的一致性。同时，比较不同方法在重新校准前后的检测一致性。研究结果显示，3种LC-MS/MS方法的总变异系数（CV）为2.7%~10.1%，加标回收率为88.8%~109.2%，表明其检测性能符合临床应用要求。一致性分析结果显示，其中两种方法在25（OH）D检测中表现出中等一致性（CCC=0.938），其余LC-MS/MS方法的一致性相关系数范围为0.322~0.853，存在一定差异。经统一校准品重新校准后，除VK外，其余脂溶性维生素的检测一致性明显改善，CCC提高至0.918~0.983。综上所述，3种LC-MS/MS方法在检测脂溶性维生素方面具备良好的性能，但方法间一致性尚存不足。通过使用统一校准品进行重新校准，可显著提升检测结果的一致性。本研究为分析脂溶性维生素临床质谱检测方法的一致化现状及其优化路径提供了数据支持，有助于提高检测结果的准确性与可靠性，从而为临床诊断与治疗提供更坚实的依据。

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准确度曲线评估在尿酚定量检测方法建立中的应用

刘晓宁, 沈袁恒, 唐伟锋, 敖俊杰, 刘军霞, 赵丽, 袁理利, 黄贤, 张前龙

2026, 44 (3): 276-285. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.04031

摘要 ( 150 )

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准确可靠的检测方法是确保结果可信的关键。受法规监管的检测实验室通常采用标准方法，仅需满足标准特征参数要求即可提供服务。然而，科研实验室多使用自建非标方法，因缺乏统一确认标准，方法准确度评估尤为重要。传统评估多依赖单项特性参数，存在标准不一、结果解释复杂等局限。近年来，法国药学科学与技术学会委员会（Société Française des Sciences et Techniques Pharmaceutiques， SFSTP）提出了一种统一、综合且易判别的准确度曲线评估方法。本研究以20种尿酚的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）检测方法为例，详细介绍该方法，并与传统方法进行对比，探讨其推广应用的可行性。本研究采用SFSTP方法逐步评估检测方法的正确度和精密度，计算β-容许区间，绘制准确度曲线，以综合评价方法的准确性和可靠性，并与传统评估方法进行对比。研究结果表明，在低、中、高3个浓度水平下，20种尿酚检测方法的批内和批间相对标准偏差（RSD）分别为2.8%~10.7%和3.3%~14.4%，合成后的中间精密度RSD为4.9%~16.6%；检测结果的相对误差为-25.3%~13.0%，按传统单项特征参数评估，20种尿酚的准确度均符合要求。而准确度曲线显示，在95%的置信水平下，13种尿酚（如双酚AF、双酚B等）在不同浓度水平的β-容许区间全部落在可接受限［-30%，30%］内，而7种尿酚（如对羟基苯甲酸苄酯、二苯酮-8等）在低或中浓度水平的β-容许区间超出了可接受范围。综上，准确度曲线评估表明，所建立的20种尿酚的HPLC-MS/MS检测方法具有较高的准确性和可靠性。与传统单项参数评估相比，该方法无需增加实验成本，仅通过一次统计分析即可清晰判断方法性能，兼具综合性（整合方法特性与风险评估）、结果直观易解释、标准统一等优势，适合广泛推广应用。

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基于血清与脑脊液脂质代谢组学的新生儿败血症生物标志物分析

吴伟祥, 刁福强, 郭军飞, 古春明, 吴立红, 骆明勇

2026, 44 (3): 286-295. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.06003

摘要 ( 169 )

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新生儿败血症是导致新生儿发病和死亡的主要原因，但目前缺乏敏感、特异的早期生物标志物，尤其是关于脑脊液（CSF）脂质代谢的系统研究仍较有限。本研究纳入17例血培养阳性的败血症新生儿及其同期阴性对照，采用液相色谱-质谱联用技术对其血清与CSF样本进行靶向脂质组学分析。首先通过单变量和多变量分析筛选差异代谢物，然后进行通路富集分析。进一步结合Boruta算法与受试者工作特征（ROC）曲线分析，筛选并评估潜在诊断标志物的效能。结果显示，败血症组血清中除甘油三酯（TAG）和二酰基甘油（DAG）外，其余脂质种类含量均显著低于对照组（P<0.05）；CSF中磷脂酰乙醇胺（PE）、神经酰胺（Cer）和溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）水平均明显下降（P<0.05）。差异分析共识别出血清中107种、CSF中34种显著下调的脂质代谢物，均未发现上调脂质。通路分析提示甘油磷脂代谢在两类体液中均显著富集。血清与CSF中共有13种差异脂质代谢物，其中LPE（18：2）、ePE（36：4）和Cer（d18：1/25：0）在两种体液中的浓度呈显著正相关（Pearson r=0.369~0.382，P<0.05）。Boruta算法识别出血清中LPC（28：1）、LPE（18：2）与ePE（36：4）3种潜在标志物，曲线下面积（AUC）分别为0.96、0.94和0.94；CSF中Cer（d18：1/26：0）、Cer（d18：1/25：0）和Cer（d18：1/24：1）的AUC为0.89、0.91和0.80，表现出良好的诊断性能。本研究系统揭示了新生儿败血症中血清与CSF脂质代谢的紊乱，尤其甘油磷脂通路在两种体液中均表现出一致性异常，提示中枢与外周代谢存在协同失衡。此外，血清脂质标志物具备良好的早期筛查潜力，CSF脂质变化则提示中枢神经系统在败血症早期可能已受累，具有神经损伤预警价值，该研究为新生儿败血症的精准诊断与发病机制研究提供了新视角。

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液相色谱-串联质谱法测定泪液中维生素A和维生素E及其与干眼的关系分析

罗保斌, 焦婧然, 白晶, 刘向祎

2026, 44 (3): 296-301. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.06017

摘要 ( 139 )

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泪液中维生素A（vitamin A， VA）和维生素E（vitamin E， VE）对于干眼的诊断和治疗具有潜在的临床预示价值，本研究建立了一种液相色谱-串联质谱法测定人泪液中VA和VE的分析方法。选用C18色谱柱（30 mm×2.1 mm， 2.6 μm），以0.1%甲酸水溶液-含2 mmol/L乙酸铵的0.1%甲酸甲醇溶液为流动相，采用大气压化学电离正离子模式，在0.4 mL/min的流速下进行梯度洗脱，4 min内可实现良好的色谱峰基线分离。经验证，该方法线性关系良好，VA的线性范围为5.00～300.00 ng/mL，检出限为2.00 ng/mL，加标回收率为98.3%～104.7%，日内精密度和日间精密度（以相对标准偏差（RSD）表示）为1.2%～7.0%；VE线性范围为25.00～1 000.00 ng/mL，检出限为6.00 ng/mL，加标回收率为97.9%～105.5%，日内精密度和日间精密度为3.0%～5.7%。使用本方法测定了5名干眼患者和9名健康志愿者的泪液标本，VA、VE质量浓度用中位数（四分位数间距）表示。干眼组泪液中VA含量为9.60（5.13～12.54） ng/mL，VE含量为42.00（31.75～128.00） ng/mL；健康组泪液中VA含量为18.10（12.46～21.69） ng/mL，VE含量为211.0（181.0～459.75） ng/mL。Wilcoxon Mann-Whitney两样本秩和检验干眼组和健康组泪液中VA、VE水平具有统计学差异，干眼组泪液中VA、VE浓度均低于健康组。本研究提供了一种简便可靠的泪液中VA、VE的液相色谱-串联质谱分析方法，探索了其与干眼的关系，为干眼相关因素的研究提供了新的可能的参考指标。

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基于液相色谱-串联质谱法分析血清和肽素的刺激因素

穆丹妮, 齐志宏, 马逸辰, 高雨濛, 李悦萌, 张琪, 禹松林, 邱玲, 程歆琦

2026, 44 (3): 302-311. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.05010

摘要 ( 143 )

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和肽素作为精氨酸加压素（arginine vasopressin， AVP）的稳定替代标志物，在多尿多饮综合征的鉴别诊断中具有重要作用。当前指南建议在高渗盐水、精氨酸输注等功能刺激试验过程中动态检测和肽素水平以协助区分AVP缺乏症（AVP-D）与原发性烦渴。这些方法在诊断价值上已获得验证，但存在一定局限性。因此，寻找更安全、可操作性强且刺激效果明确的替代刺激物成为临床研究关注的方向。此外，现有的和肽素检测只有时间分辨免疫荧光法，可能受到自身抗体、溶血等干扰。本研究旨在使用实验室自建的可靠的液相色谱-串联质谱法（liquid chromatography-tandem mass spectrometry， LC-MS/MS）评估生长激素功能试验常用刺激物，包括左旋多巴、胰岛素、胰高血糖素和奥曲肽，对和肽素水平的影响。各有28、7、20和7名进行生长激素功能试验的受试者分别接受了左旋多巴、胰岛素、胰高血糖素和奥曲肽的刺激试验。在基线、30、60、90和120 min（胰高血糖素激发试验是120和180 min）时采血进行生长激素测定，使用LC-MS/MS测定各个时间点的和肽素水平。通过Wilcoxon配对符号秩检验、曼-惠特尼秩和检验和斯皮尔曼分析考察了刺激效果和相关性。研究发现，左旋多巴使和肽素水平最大增加至基线的8.47倍（p<0.000 1），胰岛素使其水平最大增加至基线的5.85倍（p=0.031 2），胰高血糖素使其水平最大增加至基线的1.43倍（p<0.000 1），奥曲肽使其水平最大降低至基线的43%（p<0.05）。和肽素水平变化与生长激素水平变化无显著相关性。在左旋多巴刺激下，AVP-D患者的和肽素最大值显著低于非AVP缺乏症患者（p=0.000 2），受试者工作特征曲线下面积为0.98（95%置信区间0.94~1.00，p=0.002 1）。本研究显示，左旋多巴和胰岛素能有效刺激和肽素分泌，而奥曲肽则抑制其分泌。LC-MS/MS检测和肽素的方法在诊断AVP-D患者中具有潜在的临床价值，可为临床提供一种新的检测手段。

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基于知识导向的拟靶向分析方法建立及在糖尿病视网膜病变中的应用

侯衍青, 迟翔宇, 杜庭沪, 燕增旗, 侯带迪, 胡春秀, 刘月星, 刘心昱, 许国旺

2026, 44 (3): 312-328. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.02011

摘要 ( 257 )

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糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）是由糖尿病引起的常见致盲性眼病，也是全球成年人获得性视力丧失的主要原因。DR早期无症状，患者常因视力受损后再就诊而失去最佳治疗时机。传统DR检查方法存在局限性，不利于大规模快速筛查。生物标志物具有特异性和敏感性，能反映疾病所处阶段，寻找潜在生物标志物对DR早期诊断意义重大。本研究基于知识导向策略，从文献中筛选出142个与DR相关的潜在生物标志物，根据其物理化学性质，采用Merck Supelco Discovery HS F5色谱柱（100 mm×2.1 mm， 3 μm）分离代谢物，建立了基于超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）的正、负离子切换扫描分析的拟靶向分析方法，提高了分析的覆盖度和通量。以8种同位素内标对方法学进行考察，结果显示其在正、负离子模式下线性关系良好，线性范围达3个数量级以上，相关系数（r²）均在0.995以上；3个浓度水平下提取回收率为75%~108%，相对标准偏差（RSD）小于13%；在正、负离子模式下，3个浓度水平下所有同位素内标的日内精密度RSD小于5%的个数占总数的91%，日间精密度RSD小于10%的个数占总数的91%，RSD最高不超过16.3%，表明方法精密度良好。对137例血清样本进行分析，筛选出85个差异代谢物，进一步分析发现胆碱和12-羟基二十碳四烯酸作为组合标志物能有效区分DR和无糖尿病视网膜病变的糖尿病患者。本研究开发的基于知识导向策略的拟靶向代谢组学分析方法为DR筛查和诊断提供了参考依据。

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基于非靶向代谢组学的尿路上皮癌尿液生物标志物的分析

刘赛, 王默, 王玮

2026, 44 (3): 329-337. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.05018

摘要 ( 163 )

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尿路上皮癌是全球关注的常见恶性肿瘤之一，缺乏优质的生物标志物。代谢重编程被认为是恶性肿瘤的关键特征。非靶向代谢组学分析可以实现体液样本的高通量检测和无偏向性分析。本研究拟通过非靶向代谢组学方法分析尿路上皮癌患者中特异性代谢产物，筛查潜在的生物标志物。本研究在2020年1~12月于首都医科大学附属北京朝阳医院收集60份尿液样本，其中尿路上皮癌患者30份，健康对照30份。通过结构性表格收集尿路上皮癌患者和健康对照的基本临床资料和尿路上皮癌病理等信息。所有尿液样本均在侵入性操作前予以收集备用。使用四极杆轨道离子阱高分辨质谱仪进行质谱分析，并使用Progenesis QI软件计算质谱信息。尿路上皮癌组和健康对照组的基本临床资料无统计学差异（P>0.05）。研究没有在两组的主成分分析图中观察到明显的差异。进一步采用监督性的正交偏最小二乘法判别分析。结果显示，尿路上皮癌患者和健康对照的尿液代谢物差异较大，如L-组氨酸、N-乙酰-L-色氨酸和5′-甲硫腺苷等（P<0.05）。差异代谢产物涉及多种物质代谢通路，其中组氨酸代谢通路、精氨酸生物合成通路、精氨酸和脯氨酸代谢通路、色氨酸代谢通路等是最主要的，为筛选尿路上皮癌的生物标志物和潜在治疗方法提供了参考。

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磁性双功能材料的制备及用于血清中外泌体的捕获和磷肽富集

王子瑞, 郑海娇, 贾琼

2026, 44 (3): 338-348. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.04034

摘要 ( 206 )

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作为临床样本，血清因其易于获取等优势被广泛应用于疾病研究。血清中的外泌体不仅携带多种蛋白质、核酸等生物活性物质，还可以参与细胞之间的通讯，与多种疾病的发生发展相关联。作为关键的翻译后修饰之一，蛋白质磷酸化通过动态调控细胞信号网络参与疾病发生发展，其在外泌体中的特异性表达为疾病诊断提供了新视角。本论文设计制备了一种基于2-三氟甲基-4-氨基苯甲酸和Ti⁴⁺的磁性双功能材料（MagphTi⁴⁺），通过2-三氟甲基-4-氨基苯甲酸的疏水作用和Ti⁴⁺的静电作用共同锚定外泌体的双层膜，通过基质的磁响应性质实现外泌体的分离提取。同时，利用材料表面的Ti⁴⁺和磷酸根的螯合作用实现磷肽的富集。通过冷场发射扫描电子显微镜、热重分析、红外光谱、X射线光电子能谱和Zeta电位测定对MagphTi⁴⁺进行了表征。通过冷场发射扫描电子显微镜、透射电子显微镜和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳对外泌体进行了表征，验证了MagphTi⁴⁺对外泌体精准识别和快速分离的能力。以β-酪蛋白酶解物为标准磷肽模型，建立了磁性固相萃取（MSPE）-质谱检测技术平台，实现了MagphTi⁴⁺对磷肽的高选择性（β-酪蛋白与牛血清白蛋白的质量比为1∶5 000）和高灵敏度的检测（检出限低至0.4 fmol/μL）。将该方法用于实际样品分析，实现了对血清外泌体的提取与低丰度磷肽的分离富集。本方法有望用于临床血清样本中外泌体的高通量磷酸化蛋白质组学分析和疾病标志物的筛查。

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超高效液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中的塞利尼索、维奈克拉、伏立康唑及泊沙康唑

肖雄, 李月, 胡锦芳, 万青, 彭洪薇

2026, 44 (3): 349-356. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.05003

摘要 ( 189 )

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抗血液恶性肿瘤药物常具有治疗窗窄、个体差异显著及药物相互作用风险高等特点，需通过治疗药物监测（TDM）实现个体化给药。对于化疗期间因严重骨髓抑制而引发感染需联合抗真菌治疗的患者，TDM可同时优化抗肿瘤药物与抗真菌药物的血药浓度，在确保抗肿瘤疗效的同时有效控制侵袭性真菌感染风险，这一技术已成为血液系统恶性肿瘤个体化治疗的重要支撑。本研究建立了一种基于超高效液相色谱-串联质谱的分析方法，用于同时测定人血浆中抗肿瘤药物塞利尼索（selinexor， SEL）、维奈克拉（venetoclax， VEN）及抗真菌药物伏立康唑（voriconazole， VOR）、泊沙康唑（posaconazole， POSA）。色谱分离采用Kinetex^® XB-C18色谱柱（50 mm×3.0 mm， 2.6 µm），流动相为甲醇-含0.1%甲酸的10 mmol/L乙酸铵溶液，流速0.5 mL/min，梯度洗脱，进样量2 μL，分析时间为4.0 min。采用电喷雾离子源，正离子扫描，多反应监测模式进行测定。本研究对质谱参数进行了优化，并进行了方法学验证，结果表明，该方法线性关系良好，线性相关系数（r）均大于0.994，4种药物的线性范围分别为SEL 0.04~1.48 μg/mL、VEN 0.15~5.50 μg/mL、VOR 0.29~11.77 μg/mL和POSA 0.15~6.05 μg/mL；4种药物在各浓度水平的日内精密度和日间精密度相对标准偏差（RSD）≤7.1%，提取回收率均≥85.3%，方法准确度为87.4%~109.0%。采集了30例接受SEL联合VEN治疗的急性髓系白血病患者的81份临床样本进行分析，测得SEL的血药浓度为0.049~0.646 μg/mL，约30%的患者在相同疗程内SEL血药峰浓度（C_max）差异较大。本方法可为临床实践中存在药物相互作用及个体差异的血液系统恶性肿瘤患者的个体化精准治疗提供循证依据。

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超高效液相色谱-串联质谱法快速测定血浆中维奈克拉药物

朱颖, 马晓丽, 禹松林, 邱玲

2026, 44 (3): 357-362. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.06002

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维奈克拉是一种B细胞淋巴瘤因子-2抑制剂，对急性髓系白血病和慢性淋巴细胞白血病等血液系统恶性肿瘤的临床治疗具有重要作用。维奈克拉呈现显著个体间药代动力学差异，谷浓度和治疗反应显著相关，峰浓度超过警戒浓度又会引发不良反应，因此监测维奈克拉血药浓度变化至关重要。本研究建立了一种快速、灵敏、可靠的超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）用于定量测定血浆中的维奈克拉药物浓度。该方法采用电喷雾电离，正离子模式下多反应监测（MRM）检测维奈克拉及其同位素内标维奈克拉-d₈。前处理采用甲醇进行蛋白沉淀。液相分离使用C18反相色谱柱，用乙腈和0.1%甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱，维奈克拉保留时间为1.95 min。方法学验证结果显示维奈克拉线性范围为50~10 000 ng/mL，r²>0.999，方法特异性良好，批内精密度和批间精密度分别为1.8%~4.5%和2.7%~6.1%，回收率为100.3%~102.9%，基质效应为88.0%~111.0%，进样最高浓度维奈克拉（10 000 ng/mL）后在空白样本中的残留小于线性范围最低浓度峰面积的20%，满足临床要求。将该方法应用于3例急性髓系白血病患者维奈克拉的治疗药物监测，3例患者血浆维奈克拉的最高峰浓度为5 357.9 ng/mL，最低谷浓度为438.2 ng/mL。上述研究结果表明该方法能够准确、高效地定量维奈克拉血药浓度，有助于解决白血病患者的维奈克拉治疗药物浓度监测问题，指导临床个性化治疗。

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融合液相色谱-串联质谱技术与室间质量评价的临床检验专业本科毕业设计教学实践

石洁, 王默, 薛桥臻, 张顺利, 胡炎伟

2026, 44 (3): 363-370. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2025.06030

摘要 ( 124 )

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本研究旨在探索液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）技术在检验专业本科生毕业设计教学中的应用与教学创新。以25-羟基维生素D₂（25（OH）D₂）和25-羟基维生素D₃（25（OH）D₃）室间质量评价（EQA）样本的研制为教学载体，构建了以科研任务和临床工作为驱动的实验教学模式。教学设计涵盖样品制备、仪器操作、数据处理与结果评价等完整环节，使学生在实践中掌握LC-MS/MS检测的核心技术流程与质量控制方法。通过实验项目的实施，学生参与了EQA样本的制备、参考方法定值、均匀性与稳定性评价及EQA成绩的分析，全面体验了从实验设计到结果评价的过程。研究结果表明，所制备EQA样本具有良好的均匀性与稳定性，满足中国合格评定国家认可委员会（CNAS）质量标准要求。在“2024年北京市血清维生素D检测”EQA活动中，北京地区共有16家医疗机构实验室参加。教学实践显示，该项目有效提升了学生在实验设计、仪器操作、数据分析及质量评价等方面的综合能力，增强了科研思维与团队协作意识。基于“以研促教、产教融合”的教学理念，将高端分析技术引入本科教学体系，不仅优化了实验课程内容与教学环节，也拓展了学生在临床检验与科研工作中的应用视野。本研究为检验专业本科生的实践教学提供了可借鉴的教学范式，对推动先进分析技术在医学检验教育中的推广与应用具有重要参考价值。

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